cck8实验原理是什么?
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一、实验原理:
细胞活力检测试剂盒(CCK-8) 可用于简便而准确的细胞增殖和毒性分析。
其基本原理为:该试剂中含有WST-8【化学名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐】。
在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯(1-Methoxy PMS)的作用下被细胞中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲瓒产物(Formazan dye)。
生成的甲瓒物的数量与活细胞的数量成正比。因此可利用这一特性直接进行细胞增殖和毒性分析。CCK-8法是用于测定细胞增殖或毒性实验中活细胞数目的一种高灵敏度,无放射性的比色检测法,可替代传统的MTT法。
二、用途:药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验等。
三、优点: 使用方便,无需洗涤细胞,不需要放射性同位素和有机溶剂。
CCK-8法能快速检测。CCK-8法的检测灵敏度很高,甚至可以测定较低细胞密度。 CCK-8法的重复性优于MTT 法,产生的formazan 是水溶性的,减少因洗涤和溶解带来的误差。
CCK-8法对细胞毒性小,可以多次测定选取最佳测定时间,与MTT 方法相比线性范围更宽,灵敏度更高。
CCK-8细胞活性检测试剂无需预制,即开即用。